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3T3-L1細胞培養建議

【細胞簡(jiǎn)介】

3T3-L1是從小鼠胚胎中分離出來(lái)的成纖維細胞,當3T3-L1細胞從快速分裂到長(cháng)滿(mǎn)接觸抑制時(shí),該細胞經(jīng)過(guò)前脂肪向脂肪樣逆轉,該細胞可用于研究糖尿病、肥胖癥等疾病。 

圖片1.png

【細胞特點(diǎn)】

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【細胞培養建議】

l 該細胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養基中生長(cháng)良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培養基培養細胞時(shí)需要提高CO2濃度(7%-10%),森貝伽推薦使用1640培養基進(jìn)行培養效果更好。

l 該細胞起始接種密度應在3000/c㎡ ,并且在細胞達到80%融合或者密度介于5萬(wàn)-6萬(wàn)/c㎡ 時(shí)傳代,避免細胞完全融合。

l 3T3-L1這樣具有脂滴的細胞培養過(guò)程中受到壓力的表現出現空泡現象時(shí)正常的,原因可能是培養基中缺乏谷氨酰胺、添加了抗真菌劑、CO2濃度較低對培養基中碳酸氫鈉的影響或者使用的血清品質(zhì)較低培養基的營(yíng)養消耗殆盡。

l 培養密度一般控制在40-80%的匯合度,過(guò)高的匯合度,細胞可能會(huì )開(kāi)始分化。

 

【細胞常見(jiàn)問(wèn)題】

? 3T3-L1細胞在分化過(guò)程中出現異常怎么辦?

   答:細胞密度是影響3T3-L1細胞分化的重要因素,過(guò)低或過(guò)高的細胞密度都會(huì )影響分化效果;密度一般控制在40-80%的匯合度,如果太低,則會(huì )影響細胞生長(cháng),如果太高,則會(huì )導致細胞死亡。

 

? 3T3-L1細胞傳代后容易出現細胞老化的情況怎么辦?

   答:在進(jìn)行傳代時(shí),需要注意細胞的消化過(guò)程,該細胞對胰酶比較敏感,添加胰酶后約1-2分鐘內細胞會(huì )脫落,因此消化時(shí)間的把控極其重要,同時(shí)避免過(guò)度打碎細胞團,以保證細胞的生長(cháng)和分化能力。

 



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